2 月冷泉港 5 大熱門實驗技術

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2 月冷泉港 5 大熱門實驗技術原創 2016-02-19 大師兄 生物學霸

陸陸續續地回到實驗室，該重操舊業啦。生物學霸今年會給大家呈上更多最新技術及解讀，帶你裝逼帶你飛。今天帶給大家的是冷泉港二月期刊推出的最新實驗技術，一共有五個，學起來。

CRISPR–Cas9 技術構建轉基因鼠

Editing the Mouse Genome Using the CRISPR–Cas9 System

先用細菌舉例給你解釋一下啥叫基因編輯，比如我想讓細菌給我產一個蛋白，但是他不聽話，所以我只好人工地敲掉一些基因，然後再額外給他一些基因，他就能按我的要求產蛋白了。放在小鼠身上，也是一樣的，我想把小白鼠變成小黑鼠，那就該敲的敲，接著把控制顏色的基因導進去。

那麼這和 CRISPR–Cas9 技術有啥關係呢？簡單地說，以前我們沒法很好實現，因為傳統的技術費時費力還沒那麼精確。而 CRISPR–Cas9 系統可以在不到一個月的時間內，就能將設想付諸於動物模型上。這項技術的靈魂人物是年僅 31 歲的牛逼人物——張峰。

轉座子名片技術Transposon Calling Cards

酵母菌是基因工程界的網紅，他體內的基因如何調控對我們研究很重要。要理解轉錄基因如何調控，識別轉錄因子靶基因很重要。於是科學家開發了一種名叫轉座子「名片」的技術。

該技術的原理是，通過利用轉錄因子調控 Ty5 復古轉錄酶（Ty5 retrotransposase）將轉座子插入與轉錄因子結合位點相鄰的基因中。

分子梳技術在酵母菌染色體 DNA 複製中的應用

Single-Molecule Analysis of Replicating Yeast Chromosomes

先回顧一下高中生物知識，在講 DNA 半保留複製時，原核生物和真核生物有何共同點、不同點。比如都有複製起始點、都有複製叉。真核生物 DNA 複製要更複雜。

真核生物染色體 DNA 的複製發生在每個細胞周的 S 期。在複製叉雙向移動的特定結構（稱為起點）中，複製是受高度調節的和啟動的。複製是如何調節的呢？有哪些特徵呢？於是就有了染色體複製動力學，也就有了一些技術。

宏觀水平的複製視角，例如基於流式細胞術、基於二維和凝膠電泳。後來在 50 年前，DNA 纖維分析法，在單個 DNA 纖維水平上揭示 DNA 複製特性。再到最近的 DNA 分子梳技術，該技術已經成功的應用在出芽酵母菌上，用來監測複製叉發展進程以及起始點的用途。

想想都覺得好牛叉，這些東西我只在書本里背過，還記不清楚，偉大的科學家卻監測了這個過程。

如何檢測秀麗隱桿線蟲自噬？Detection of Autophagy in Caenorhabditis elegans

通俗地說，自噬就是細胞自己把自己給分解了。靠的是什麼呢？溶酶體。誰喜歡干這事？秀麗隱桿線蟲、酵母等。好好地幹嘛自噬呢？因為生命過程正常進行需要。怎麼識別呢？有種技術叫RNA干擾（RNAi），還有染色體突變導致的基因失活。

不太懂？詳細看看最新刊文，闡述了自噬在部分過程中的作用，同時提供了一些有關秀麗隱桿線蟲自噬研究的方法。值得注意的是，本文總結了自噬是如何在胚胎、幼體、成體中形成的，如何通過 western blot 檢測泛素類修飾因子 LGG-1 的脂化檢測，以及如何通過RNAi抑制自噬基因。

腫瘤遷移實驗論最新突破

Methods to Study Metastasis in Genetically Modified Mice

腫瘤細胞脾氣比較大，一般藥物不好控制，怎麼辦呢？要想打入他先了解他。於是就有了腫瘤遷移模型。可以這樣來理解這個模型，找一隻免疫缺陷的老鼠，再把腫瘤細胞這種外來物種移植。然後就可以開始研究。

最新刊文詳細闡述了一種在轉基因小鼠腫瘤遷移研究方面完整的方法論，並以肺癌為例子，詳細闡述了如何利用攜帶有強人致癌基因表達調控的動物模型來進行研究。

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