一個Bio-Medical Student的自我「救治」之路

來自專欄癌症生物學 Cancer biology4 人贊了文章

作為一個「混跡」在醫院的科研民工，數月來疾病纏身，行動能力嚴重受阻，極大地影響了我進行偉大科(苦)學(逼)事(搬)業(磚)，先是耳朵劇痛並且流膿，夜不能寐，無奈之下去了校醫院開了葯，然而感覺唯一起作用的是止痛片，後來又陸續反覆過幾次最後竟然發展到屁股和腿上交替長痘流膿，實在不行，便去了自己醫院樓下的急診（風水輪流轉呀，自己也終於成為病人一員了，儘管每天都待在醫院，但是這是第一次去正式體驗香港的醫療）先是分診台，儘管已經強調了我而過很疼，還是被無情的耳道鏡捅到彪眼淚，然後被分到「次緊急」類型，按照慣例應該至少幾個小時，遂決定上樓忍者「劇痛」（此處應該告知老闆）進行了一個小實驗，然而沒想到當天竟然出奇的快，不到半小時就過號了，重新加簽，這下真的是等了幾個小時了。不出意外了再次被「捅」，後來拿了一個滴耳液和口服抗生素，還有耳鼻喉專科的轉診單，重新去隔壁棟專科門診重新挂號，本來準備排隊再see 一次doctor，可是定睛一看預約單竟然2019年，懵逼的我以為寫錯了，再次找醫護人員確認，然而對方投來一個關懷的眼神，「沒錯，就是半年後的」(無力吐槽並十分懷念內地的醫院呀)話說半年以後，我怕是真的成為」身殘」志堅的科研狗了。。。

無奈只能堅持科研，果不其然又進入一個新的cycle，5天以後耳朵是好了，然而三天前起的一個在腹股溝的痘痘卻已經疼得讓我寸步難行了，終於我只能投入社會主義懷抱，回深圳see a doctor，不想一著急竟然掛到一個女醫生(這讓我這個腹股溝的痘痘情何以堪)，不過神馬都是浮雲，心一橫，找到一個好的角度，迅速的給醫生「展示」一番，果然主任，很快得出結論，再次給我另外一種抗生素外加苯扎氯銨外用殺菌液，並且婉拒了我進行血常規的化驗請求，期間對我熬夜不是玩耍而是獻身醫學科研事業的精神表示了肯定，然而回來後疼痛並沒有減輕，最終忍無可忍，為一個生物醫學生的尊嚴，為了充分發揮實證主義的科(作)學(死)精神，決定自己動手。

一個好的實驗一定要經過慎重的思考，充足的準備，遂制定以下實驗計劃：

實驗目的：分離鑒定自身感染菌株

實驗材料：滅菌棉簽，無菌PBS，LB & LB A+平板(一年前剩下的AMP final concentration 50ug/ml)，恆溫孵育箱

實驗日期：2018年9月10日

1. 提前準備好滅菌的棉簽(前幾天耳朵流膿買的)做取樣工具，同時準備LB平板
2. 前一天晚上用消毒好的針戳開膿點(疼到懷疑人生)，進行引流，減壓，第二天忍者劇痛，擠出一大滴質地純真的淺黃色膿液，用滅菌棉簽蘸取膿液(此步在衛生間完成)，然後迅速將棉簽浸入200ul無菌PBS中，轉入生物安全櫃中操作
3. 分別取50ul菌液使用L型塗布棒將菌液塗布均勻
4. 37攝氏度恆溫培養箱過夜培養

下午打開培養箱，肉眼可見出現了典型的黃色菌落，並且氨苄平板也有了菌落，儘管氨苄濃度不高，但是可見這個菌對於氨苄有部分抗性，可也許就是為什麼幾次吃抗生素後來都複發的原因。

5. 然後LB和LB(AMP+) 各挑取兩個單克隆進行培養(37°C 220RPM),8小時後下時候肉眼目測OD600>2，20%甘油負八十冷凍保存菌株，命名為Mybacteria1-4，便於後續進行抗生素敏感性測試

運(懶)氣(惰)很(成)好(性)，剛好實驗室的另外勤奮的一個同學第二天要進行PCR，所以便厚顏無恥的代跑了PCR(鳴謝Sunrise )童鞋,對16srRNA gene hypervariable regions V1~V4 進行擴增(背景知識參考以下小卡片)，儘管條帶很弱呀(內心很虛),不過仍然送了進行測序，第二天拿到測序結果擴增總長770bp，在Sunrise童鞋的見證下進行blast（鳴謝NCBI）