細胞污染圖片大全+處理方法，拯救實驗小白！
細胞被污染?同學，你不是一個人!
不管是新手還是老手，沒有經歷過過細胞污染的人一定不是一個合格的細胞飼養員，
如何成為一個養細胞的「老司機」呢?
你只要做到——遇到細胞被污染時，面不改色心不跳，反手就能處理好!
細胞污染主要分為三類分類: 物理性、化學性、生物性污染。
其中生物性污染常見且造成的後果也較為嚴重，培養的細胞一旦遭到微生物污染，那麼科研進度只怕要大大延遲。
怎樣判斷你的細胞是何種生物性污染?
1、細菌污染
常見細菌種類為大腸桿菌、枯草桿菌、假單胞菌等(革蘭陰性菌)、 葡萄球菌等(革蘭陽性菌)，其中革蘭陽性菌較為多見。
主要來源：操作不當或是器材消毒不嚴，或是各種營養成分隱性污染細菌沒有被檢測出來所造成的。
特點：污染速度快，易被發現。多數情況下細胞培養液短時間內變黃，培養基1～2d就會變渾濁，pH值降低，倒置顯微鏡下觀察，可見胞漿出現大量顆粒，細胞變圓或崩潰，從壁上脫落，培養液中有大量圓球狀顆粒物漂浮，呈細沙狀，污染較輕時可見小菌體在細胞間運動。
處理措施：
- 在培養液中添加雙抗（P/S）處理；可用抗生素的常用量的5~10倍作衝擊療法，用藥24~48h後再換常規培養液；
- 另外添加西司他丁鈉和亞胺培南處理細胞，適用於培養用具被打翻、使用了污染的培養液或要培養污染的組織或者凍存細胞的污染情況。
- 裸鼠體內接種法是比較有效和徹底的除菌方法。主要包括腹水接種和皮下荷瘤分離細胞。既能徹底清除污染細菌，又能保持腫瘤細胞的來源特徵和惡性特性。對於一些特別珍貴的腫瘤細胞，可採用裸鼠體內接種法。
2、真菌污染
污染培養細胞的多為煙麴黴、黑麴黴、毛黴菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。
主要來源：實驗人員(實驗服)
特點：短期內不會引起培養液的渾濁，可在培養液中形成白色或黃色漂浮物，一般肉眼可見，較易被發現，4d左右才可在高倍鏡下觀察到絲狀、管狀或樹枝狀菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養基中，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。
念珠菌污染呈鏈狀排列，呈卵圓形散在細胞周邊和細胞之間。
酵母污染很容易觀察到，培養物變渾濁，尤其在後期。一般pH值變化很小，嚴重時，pH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒，有些會芽生較小顆粒。
處理措施：
- 添加制黴菌素和兩性黴素B，但是對細胞的毒性也較大；
- 環境徹底消毒：先後用酒精、新潔爾擦洗培養箱；水盤加上飽和量的硫酸銅。
- 若細胞不是特別珍貴，建議丟棄。
3、支原體污染
支原體是一類無細胞壁、大小介於細菌和病毒之間(直徑在0.13～0.18 μm)並獨立生活的微生物，可穿過0.22 μm 的孔徑濾膜!光鏡下難以看清它的形態結構!並對青黴素有抗藥性!簡直就是細胞培養界的隱性殺手有木有!
主要來源：血清
特點：支原體污染不能用肉眼或光學顯微鏡檢查細胞觀察出來，帶有一定的隱蔽性，易被人們忽視。當細胞被支原體污染後，在光鏡下常可見到細胞核及胞漿內出現大小不等的顆粒或空泡，細胞營養液可能毫無變化，短期內細胞沒有明顯的病理變化，也可以因為傳代或換液而緩解。只有當污染嚴重時才影響細胞增殖，使細胞脫落。支原體可以與宿主細胞形成一個共生關係，使污染不斷擴大。
檢測：常用的檢查方法為培養檢測法，即取1mL細胞培養液加入支原體液體培養基中，培養5天後，觀察培養基的顏色變化。如果變黃則懷疑該細胞受到支原體污染。如果不變色，則盲傳一代。
若顏色變黃，可接支原體固體培養基，於5%CO2培養箱中培養3～5天，觀察有無「煎蛋」狀支原體菌落。一旦發生污染即淘汰該細胞和培養液。
此外，支原體污染還可用熒光染色法和相差顯微鏡觀察法等檢測方法,或者直接購買支原體檢測試劑盒進行檢測。
處理措施：
- 定期用支原體試劑盒檢測；
- 換液可以減緩污染情況，但無法根除；
- 支原體清除試劑盒可以達到較好效果；
- 小鼠腹腔巨噬細胞清除法。
好物推薦——procell支原體清除培養基
Procell支原體清除培養基是Procell含有清除「支原體」的特殊成分(一種混合製劑，可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果，最大程度上挽救珍貴的細胞，減少因支原體污染帶來的損失)。
本產品經過了數十種細胞的測試和長期的實驗驗證，對細胞無害，對清除「支原體」污染效果顯著，能夠很好的抑制和殺滅「支原體」。
4、黑膠蟲污染
黑蛟蟲是一種生物還是非生物，學術界還有爭論。可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播。
主要來源：血清
特點：開始污染時對細胞無影響，當數量達到一定程度時就會對細胞產生影響。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀遊動小體。，培養液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之後會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。
處理措施：
- 更換血清；增加細胞密度，提高細胞的生長率。
好物推薦——Procell 「黑膠蟲」清除培養基
Procell 黑膠蟲清除培養基經過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證，對細胞無害，對清除「黑膠蟲」污染效果顯著，能夠很好的殺滅和抑制「黑膠蟲」，秒殺其它品牌的支原體培養基。
5、病毒污染
儘管病毒污染的細胞不影響原代培養，但生產疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物製品製作中的難題。
主要來源：動物血清或者細胞系，常見於雜交瘤細胞。
特點：極為隱蔽，很難用常規的方法檢測到。受病毒污染的細胞液通常清亮無變化，大多數受病毒污染的細胞不會產生形態變化及細胞病理現象，少部分病毒會造成細胞變圓、腫脹，脫落。
檢測：可用血細胞吸附試驗、免疫熒光抗體法及電子顯微鏡法有效檢出病毒。通常病毒物污染的清除是十分困難的，可以重新引入高質量的細胞株。
6、非同種細胞污染
即細胞交叉污染，一般來自細胞建株和細胞傳代過程中兩種或兩種以上細胞之間的混合污染。一種是由於細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開，往往會使一種細胞被另一種細胞污染，另一種情況則是提取原代細胞時在消化過程中由於剪割的組織塊不夠純，消化時間把握不好，容易把雜質細胞消化混入原代細胞培養中。
處理方式：針對病毒和交叉污染較難清除，建議丟棄細胞重新培養；
最後，學霸姐姐想說：
學會對各種污染情況的辨別和處理是一項不可或缺的實驗技能，希望大家在看完我們的文章後結合你的實驗操作，學會如何應對細胞污染。
生物女學霸，一個自稱學霸其實很渣的生物汪，
努力將有趣的、有用的、有血有肉的科研那些事兒呈現給大家，關注一個好不啦~